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T4 RNA Ligase 2

  • Cat.No.ON-544-C010
  • Cas.No.
  • 来源N/A
  • 纯度10U/μL
  • 储存条件-20℃
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产品描述: T4 RNA Ligase 2,也称为 T4 Rnl 2,具有分子间和分子内 RNA 连接活性。T4 RNA Ligase 2 连接双链 RNA 缺口的活性比连接单链 RNA 缺口的活性更高。该酶可连接相邻的 5'-磷酸和 3'-羟基。在双链结构中,该酶还可以连接 RNA 的 3'-羟基和 DNA 的 5'–磷酸。

规格: 10U/μL

活性单位定义: 一个单位定义为:在 20μL 反应体系中,37°C 孵育 30 分钟,将 0.8μg 等摩尔比的 28-mer 和 18-mer RNA 进行连接,连接 50% 所用的酶量。

酶存储缓冲液: 10mM Tris-HCl, 50mM KCl, 35mM (NH4)2SO4, 0.1mM DTT, 0.1mM EDTA, 50%(v/v) Glycerol, pH7.5@25℃.

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中文图示-800px.jpg


T4 RNA ligase 1,T4 RNA ligase 2,RNaseR 在环状 RNA 酶法合成上的应用:

IVT 反应得到线性 RNA:值得注意的是,此步 IVT 反应,需要掺入一定比例的 GMP,获得含 GMP 的线性 RNA;

RNA 环化:通过 T4 RNA 连接酶 1(T4 Rnl 1)或 T4 RNA 连接酶 2(T4 Rnl 2)催化 RNA 末端 5'-磷酸和 3'-羟基的连接,将 RNA 分子内两端连接产生环状 RNA;

去除线性 RNA:RNaseR 能够去除反应液中的所有线性 RNA 分子,从而得到无线性 RNA 的环状 RNA。


注意:T4 RNA ligase 2 的反应体系中需要加入 ATP,可使用 ATP,100mM Solution,Cat#R1331。

储藏条件: Stored at -20±5℃. Do not store in a frost-free freezer. Always avoid freeze-thaw cycles or exposure to frequent temperaturechanges. These fluctuations can greatly alter product stability.

质控检测:

1. Contaminant Assay: Free of Endonuclease, Exonuclease and RNase activities.

2. Endotoxin Assay: Pass.

3. Physical Purity: >95% by SDS-PAGE with Coomassie® blue staining.

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