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pfu DNA polymerase

  • Cat.No.ON-051
  • Cas.No.
  • 来源重组大肠杆菌
  • 纯度>95% by SDS-PAGE
  • 储存条件-20℃
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产品描述:pfu DNA polymerase是一种热稳定的DNA聚合酶,其分子量为90kD。具有5'-3'DNA聚合酶活性和3'-5'外切酶活性,能纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配。pfu DNA polymerase相比于Taq DNA Polymerase出错率较低的,其错误率仅为1.3x10-6。其PCR产物为平端,可加A处理再与TA载体连接或使用平末端克隆载体。

来源:重组大肠杆菌

规格:3U/μL

活性单位定义:1单位活性定义为74℃、30分钟内,掺入10nmoles的dNTPs到酸性不溶物质所需的酶量。

酶存储缓冲液:50mM Tris-HCl (pH8.2, 25℃), 0.1mM EDTA, 0.1% Tween-20, 0.1% NP-40, 1mM DTT, 50% Glycerol

配套溶液:10X pfu Reaction Buffer, ON-068, 200mM Tris-HCl(pH8.8, 25℃),100mM KCl, 100mM (NH4)2SO4, 20mM MgSO4, 1%Triton X-100.

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1. pfu  DNA polymerase具有3'→5'的外切酶活性, 因此延伸率 (0.5-0.6kb/min) 低于 Taq DNA Polymerase(1kb/min), 延伸时间取决于扩增产物的长度;同时, 由于3'→ 5'的外切酶活性, pfu DNA Polymerase 聚合酶可能会降解引物, 因此配制反应体系时最后加入pfu  DNA Polymerase。

2. 在用 pfu DNA Polymerase扩增时, 需要更高的引物纯度。底物长度应大于 18 bp, Tm 值在55-80℃, 引物浓度在0.1-0.5μM之间, 略高于Taq DNA Polymerase.

3. 对于高GC含量的模板, 变性温度可提高到 98℃,对 DNA Polymerase活性无影响。

储藏温度:-20℃

质控检测:无DNase、Nickase、RNase污染

纯度:SDS-PAGE纯度:大于95%

1. Kelly S. Lundberg, Dan D. Shoemaker, Michael W. W. Adams, et al. Gene 108, 1-6 (1991).

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