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Uracil-DNA Glycosylase (UNG), heat-labile

  • Cat.No.ON-054
  • Cas.No.
  • 来源重组大肠杆菌
  • 纯度>95% by SDS-PAGE
  • 储存条件-20℃
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产品描述:Uracil-DNA Glycosylase (UNG), heat-labile是经大肠杆菌表达、纯化的来源于嗜冷海洋细菌的重组蛋白。能特异性识别DNA单链或双链中的尿嘧啶残基,并从DNA上水解释放游离尿嘧啶。对RNA无活性。该酶主要用于PCR扩增产物的防污染。大肠杆菌来源的尿嘧啶-DNA 糖基化酶较为耐热,经95℃,10min处理仍会残留有少量的尿嘧啶-DNA 糖基化酶活性,导致含有dU碱基的PCR产物的降解。来源于嗜冷海洋细菌的Uracil-DNA Glycosylase (UNG), heat-labile 在50℃,2min即完全失活,在进行PCR扩增前,在PCR混合液中添加尿嘧啶-DNA 糖基化酶(热敏性),25℃,10min即可消除以往PCR产物的残留污染,由于尿嘧啶-DNA 糖基化酶(热敏性)在PCR循环的94℃变性一步便可被灭活,因此不会影响新的含dU的PCR产物。

来源:重组大肠杆菌

规格:1U/μL

活性单位定义:37℃条件下,1小时降解1μg含尿嘧啶碱基的单链DNA的酶量为1U。

酶存储缓冲液:20mM Tris-HCl (pH8.0), 0.1mM EDTA, 100mM KCl, 1mM DTT, 0.5%(v/v) Tween-20, 0.5%(v/v) NP-40,50%(v/v) glycerol.


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1. Uracil-DNA Glycosylase (UNG),E.coli  失活条件为95℃ 10min,但是Uracil-DNA Glycosylase (UNG), heat-labile的失活条件为50℃ 2min。

2. 在缺少稳定剂的buffer中(如PCR buffer: 10mM Tris-HCl, pH8.0, 50mM KCl, 2.5mM MgCl2) ,酶随着温度的升高而加速失活。

3. 建议50μL PCR反应体系中加入1U的Uracil-DNA Glycosylase (UNG), heat-labile。

4. Uracil-DNA Glycosylase (UNG), heat-labile在15~25℃范围内,拥有100%的酶活。

储藏温度:-20℃

质控检测:无DNase,Nickase和 RNase污染

PCR carry-over prevention: 以5ng dUTP-containing PCR 产物为模板扩增200bp目的DNA。在扩增前加入1U Uracil-DNA Glycosylase (UNG), heat-labile 25℃,10min,无产物进行扩增。

纯度:SDS-PAGE纯度:大于95%

1. H. Sobek, M. Schmidt, B. Frey, K. kaluza. FEBS Letters. 388, 1-4(1996).

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