产品描述：Alkaline Phosphatase, TAB5 非特异性的催化DNA和RNA 5'和3'端的磷酸单酯键，也可以催化NTPs和dNTPs。80℃ 2 min可完全失活。
来源：重组大肠杆菌
规格：2.5U/μL
活性单位定义：1单位活性定义为37℃，30分钟内，对限制性内切酶作用的5'端内陷的1μg pUC19 质粒去磷酸化所用的酶量。去磷酸化定义为在自连反应中对自身环化的抑制率＞ 95%，通过转化到DH5α进行判断。
酶存储缓冲液：10mM Tris-HCl , 1mM MgCl2, 0.01mM ZnCl2, 50%(v/v) glycerol, pH7.4, 25℃.
配套溶液：10X Phosphatase Reaction Buffer, Cat#ON-180, 500mM Bis-Tris-Propane-HCl , 10mM MgCl2, 1mM ZnCl2, pH6, 25℃.
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反应流程：
DNA为底物：
1. 按下列配方配置反应液：
| 5'-Phosphate-DNA | 1μg |
| 10X Phosphatase Reaction Buffer | 2μL |
| Alkaline Phosphatase, TAB5 | 2.5~5 units |
| Nuclease-free H2O | To 20μL |
2. 37度保温30分钟
3. (可选）80度2分钟热失活Alkaline Phosphatase, TAB5。
RNA为底物：
1. 按下列配方配置反应液：
| 5'-Phosphate-RNA | 1μg |
| Nuclease-free H2O | To 15μL |
2. 65度保温5~10分钟，然后立刻放冰上
3. 反应管中加入如下试剂
| 15μL | Heat denatured RNA from step 1 (above) |
| 2μL | 10X Phosphatase Reaction Buffer |
| 2.5~5 units | Alkaline Phosphatasae, TAB5 |
| 20 units | RNase inhibitor (Recommend) |
| 20μL | Total reaction volume |
4. 37度保温30分钟
5. 选用下列一种方式终止反应：
A）直接放入-20度或-70度冰箱；
B）加入EDTA至终浓度大于2mM；
C）酚氯仿抽提，然后盐/醇沉淀RNA
储藏温度：-20℃
质控检测：无DNase、Nickase、RNase污染
纯度：SDS-PAGE纯度：大于90%
1. Maria Rina, Charalambos Pozidis, et al. Eur. J. Biochem. 267, 1230-1238 (2000).
2. Ellen Wang, Dimitris Koutsioulis, et al. J. Mol. Biol. 366, 1318-1331(2007).
3. Ping Li, Jon Beckwith, et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA.85,7685-7689(1988).