CN EN JP
account_circle 登录
home 首页 navigate_next 产品中心 navigate_next 酶产品 navigate_nextRNA相关navigate_nextRNA连接酶

T4 RNA ligase 1 (ssRNA ligase)

  • Cat.No.ON-081
  • Cas.No.
  • 来源重组大肠杆菌
  • 纯度>95% by SDS-PAGE
  • 储存条件-20℃
add_shopping_cart 加入购物车 comment咨询

产品描述:T4 RNA ligase 1是ATP依赖的连接酶,底物作用范围较广,包括单链RNA、DNA、寡核糖核酸链、寡脱氧核糖核酸链和各种各样的核酸衍生物。该酶催化5'-磷酸和3'-OH形成磷酸二酯键。

来源:重组大肠杆菌

规格:10U/μL

活性单位定义:1单位活性定义为在20μL 1X T4 RNA Ligase Buffer 中,37℃、30分钟内,将0.4μg等摩尔比的两条23bp单链的RNA(其中一条是5'-磷酸化的)进行连接,连接50%所用的酶量。

酶存储缓冲液:10mM Tris-HCl (pH7.5, 25℃), 0.1mM EDTA, 500mM KCl, 1mM DTT, and 50% (v/v)Glycerol.

配套溶液:10X T4 RNA Ligase Buffer, Cat#ON-111, 500mM Tris-HCl pH7.8, 25℃, 100mM MgCl2, 10mM ATP, 100mM DTT.50% PEG 8000, Cat#ON-112, 50% PEG 8000(w/v)


相关产品推荐:

Ribonuclease Inhibitor, Human Placenta, Cat#ON-039

10X T4 RNA Ligase Buffer, Cat#ON-111

50% PEG 8000, Cat#ON-112

实验操作:用于单链RNA的连接

1. 在反应管中按下列顺序添加响应试剂:  

Donor RNA40-200pmol
Acceptor RNA20pmol
10X T4 RNA Ligase Buffer2μL
Ribonuclease inhibitor (40U/μl)0.5μL
PEG 8000, 50%8μL
T4 RNA ligase 1(10U/μL)1μL
Nuclease-free H2Oto 20μL

注意事项:Donor RNA 必须要含有5'-磷酸基团,Acceptor RNA 必须要含有3'-OH基团;

2. 将反应液37℃保温30分钟或16℃保温16小时;

3. 添加EDTA至11mM可以终止反应。

储藏温度:-20℃

质控检测:无DNase、RNase污染

纯度:SDS-PAGE纯度:大于95%

1. Thomas J. Snopek, William B. Wood, M. Patricia Conley, et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 74, 3355–3359 (1997).

2. Robert Silber, V.G. Malathi, and Jerard Hurwitz. Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 69, 3009-3013(1972).

3. Uhlenbeck, O.C. and Gumport, R.I. (1982) In: The Enzymes, Boyer, P.D., ed., Academic Press, New York, NY.

4. Romaniuk, P.J. and Uhlenbeck, O.C. (1983) Joining of RNA molecules with RNA ligase. Methods Enzymol. 100, 52–9.

keyboard_arrow_up
copyright © 2021 上海兆维科技发展有限公司 All Rights Reserved 沪ICP备2021013921号

登录

close

register

close
shopping_cart

shopping cart

check_circleSubmit order