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mRNA Cap-2'-O-Methyltransferase

  • Cat.No.ON-014
  • Cas.No.
  • 来源重组大肠杆菌
  • 纯度>95% by SDS-PAGE
  • 储存条件-20℃
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产品描述:mRNA Cap-2'-O-Methyltransferase是经大肠杆菌表达、纯化的来源于牛痘病毒的重组蛋白。能特异性的将SAM中的甲基转移至RNA Cap0上形成Cap1的结构。Cap1结构的RNA更能有效的翻译,改善mRNA转染实验中的蛋白表达量。mRNA Cap-2'-O-Methyltransferase需要以m7GpppN Cap 结构的RNA为底物。

来源:重组大肠杆菌

规格:50U/μL

活性单位定义:1单位酶活定义为37℃,1小时掺入10 pmols 甲基到80nt Capped 0 RNA所用的酶量。

酶存储缓冲液:20mM Tris-HCl (pH8.0), 0.1mM EDTA, 100mM NaCl, 1mM DTT, 0.1%(v/v) Triton X-100, 50%(v/v) glycerol.

配套溶液:10X Capping Buffer, Cat#ON-073, 500mM Tris-HCl, pH8.0, 50mM KCl, 10mM MgCl2, 10mM DTT; S-adenosylmethionine (SAM),32mM, Cat#ON-074.

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10X Capping Buffer, Cat#ON-073

S-adenosylmethionine (SAM),32mM, Cat#ON-074

1. 反应体系中不能含有EDTA;

2. 如为了RNA的稳定性,而加入核糖核酸酶抑制剂,按手册中反应体系加入至终浓度为1U/μL即可;

3. 在PH7.0-8.0,SAM不稳定,每次反应前需要新稀释SAM至2mM

4. 在反应前,应对RNA进行热处理,保证转录产物的5'末端二级结构打开;对高二级结构的RNA可以提高热变性条件,如65度20分钟,或75度10分钟,或85度5分钟;

5. Vaccinia Capping Enzyme 和 2'-O-methyltransferase 可以一起反应用于生产Cap1结构的RNA;

6. 对部分已知的含有复杂5'结构的RNA,反应时间可以延长至3小时。

储藏温度:-20℃

质控检测:无DNase,RNase污染

纯度:SDS-PAGE纯度:

1. THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY Vol. 250, No. 24, Issue of December 25, pp. 9322-9329,1975.

2. Kuge, H. et al., (1998) Nucl. Acids Res. 26, 3208.

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