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RNase III, E.coli

  • Cat.No.ON-024
  • Cas.No.
  • 来源重组大肠杆菌
  • 纯度>90% by SDS-PAGE
  • 储存条件-70℃
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产品描述:RNase III, E.coli是同源二聚体,二价金属依赖的核酸酶。RNase III, E.coli作用于长的双链RNA(dsRNA),产物为12-30bp的dsRNAs,且为5'-PO4, 3'-OH,3'端突出两个核苷酸。

来源:重组大肠杆菌

规格:0.5U/μL

活性单位定义:1单位活性定义为37℃、20分钟内,降解1μg dsRNA为siRNA所需的酶量。

酶存储缓冲液:500mM NaCl, 20mM Tris-HCl (pH8.0, 25℃), 0.5mM EDTA, 0.5mM DTT, 50% Glyercol.

配套溶液:

10X RNaseIII Reaction Buffer, Cat#ON-078, 500mM Tris-HCl (pH7.5, 25℃), 500mM NaCl, 10mM DTT

10X MnCl2, Cat#ON-079, 200mM MnCl2

10X EDTA, Cat#ON-080, 500mM EDTA

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10X RNaseIII Reaction Buffer, Cat#ON-078

10X MnCl2, Cat#ON-079

10X EDTA, Cat#ON-080

建议的操作规程:

1. 按照顺序加入下列试剂:

ddH2OX μL
10X RNaseIII Reaction Buffer10μL
dsRNAX μL(10μg)
RNase III10-20 units
10X MnCl210μL
Total Volume100μL

2. 混合后,37℃反应20分钟。

3. 加入10μL 10X EDTA终止反应。

储藏温度:

长期储存 (使用频率低时): -70℃

每周或者每天使用: -20℃*

不能储存在无霜冰箱中。

尽量避免反复冻融,避免放在温度经常变化的地方。这些温度波动会大大的降低产品的稳定性。

*RNase III 储存在-20℃ 可能会有浑浊的现象产生,将酶置于室温,待温度达到4~10℃,然后轻轻混合,酶会澄清,并且酶活几乎没有损失。

质控检测:无DNase,Nickase污染,通过功能检测

纯度:SDS-PAGE纯度:大于90%

1. Hugh D. Robertson, Robent E. Webster, and Norton D. Zinder. The Journal of Biological Chemistry. 243, 82-91(1968).

2. Neelam Srivastava and Rai Ajit K Srivastava. Biochemistry and Molecular Biology International. 39, 171-180(1996).

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