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T7 RNA polymerase

  • Cat.No.ON-004
  • Cas.No.
  • 来源重组大肠杆菌
  • 纯度>95% by SDS-PAGE
  • 储存条件-20℃
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产品描述:T7 RNA Polymerase是一种噬菌体编码的以DNA为模板的RNA聚合酶。它识别特殊的启动子——T7启动子,以5'-3'的方向合成RNA。T7 RNA Polymerase的分子量为99kD,并由883个氨基酸构成。

来源:重组大肠杆菌

规格:50U/μL 或客户定制

活性单位定义:1单位活性定义为37℃、60分钟内,掺入5nmoles的rCTP到酸性不溶物质所需的酶量。

酶存储缓冲液:20mM Tris-HCl PH 7.9, 100mM NaCl, 10mM DTT, 0.1% Triton X-100, 1mM EDTA, 50%(v/v) Glycerol.

配套溶液:10X IVT Reaction Buffer, Cat#ON-062,  400mM Tris PH7.9, 100mM DTT, 20mM Spermidine, 60mM MgCl2.

10X IVT Reaction Buffer without Mg2+ , Cat#ON-041, 400mM Tris PH7.9, 100mM DTT, 20mM Spermidine


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1.T7 RNA聚合酶对盐抑制极其敏感,总体盐浓度最好不超过50mM。

2.为了获得更高的RNA产量:

1)可以通过提高NTP浓度(每个浓度可达10mM);

2)Mg2+浓度应高于NTP总浓度4~10mm;

3)将T7 RNA聚合酶提高到3万单位/mL;

4)另外,无机焦磷酸酶添加到最终浓度为4单位/mL。

3.即使储存在-20°C,随着时间的推移,酶活性仍会明显降低,可能是由于反应缓冲液中DTT的分解造成的。

若出现产量下降,试着像反应液中添加20mM DTT。或者配制无DTT的反应缓冲液,完成反应时加入新鲜DTT。

储藏温度:-20℃

质控检测:无DNase、Nickase、RNase污染

纯度:SDS-PAGE纯度:大于95%

1. Chamberlin, M., McGrath, J. & Waskell, L. Nature 228, 227–31 (1970).

2. Davanloo, P., Rosenberg, A. H., Dunn, J. J. & Studier, F. W. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 81, 2035–9 (1984).

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