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Poly(A) Polymerase

  • Cat.No.ON-126
  • Cas.No.
  • 来源重组大肠杆菌
  • 纯度>95% by SDS-PAGE
  • 储存条件-20℃
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产品描述:Poly(A) polymerase是 以ATP为底物对RNA的3'羟基端添加腺苷酸形成polyA尾部结构。

来源:重组大肠杆菌

规格:5U/μL

活性单位定义:1单位活性定义为20μL的反应体系,37℃、10分钟内,掺入1nmol AMP 到酸性不溶物质所需的酶量。

酶存储缓冲液:20mM Tris-HCl (pH7.5, 25℃), 1mM EDTA, 300mM NaCl, 1mM DTT, 0.1%(v/v) Triton X-100, 50%(v/v) glycerol

配套溶液:10X poly(A) Polymerase Reaction Buffer, Cat#ON-127, 500mM Tris-HCl, (pH7.9, 25℃), 2.5M NaCl, 100mM MgCl2.


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10X poly(A) Polymerase Reaction Buffer, Cat#ON-127

操作流程:本流程适用于小于10μg的RNA添加150bp长度的poly(A)尾部结构。来源于IVT反应的RNA需要纯化后,才能用于poly(A)加尾反应。

1. 按下列配方配置反应液:

RNA1~10μg
10X poly(A) Polymerase Reaction Buffer2μL
ATP(10mM)2μL
Poly(A) polymerase1μL
(可选) Rnase inhibitor20units
Nuclease-free H2Oto 20μL

2. 37度保温60分钟

3. 终止反应,加入EDTA至终浓度大于11mM

* 热变性的RNA可能会提高加尾反应的效率

储藏温度:-20℃

质控检测:无DNase、Nickase、RNase污染

纯度:SDS-PAGE纯度:大于95%

1. Bernstein P and Ross J (1989) Poly(A), poly(A) binding protein and the regulation of mRNA stability. Trends Biochem Sci 14: 373–377.

2. Gallie DR (1991) The cap and poly(A) tail function synergistically to regulate mRNA translational efficiency. Genes Dev 5: 2108–2116.

3. Krug, M.S. and Berger, S.L. (1987) Methods Enzymol. 152, 262.

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