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pfu DNA polymerase

pfu DNA 聚合酶
目录号
ON-051
纯度
>95% by SDS-PAGE
储存条件
-20℃
来源
重组大肠杆菌

产品描述:pfu DNA polymerase 是一种热稳定的 DNA 聚合酶,其分子量为 90kD。具有 5'-3' DNA 聚合酶活性和 3'-5' 外切酶活性,能纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配。pfu DNA polymerase 相比于 Taq DNA Polymerase 出错率较低,其错误率仅为 1.3x10-6。其 PCR 产物为平端,可加 A 处理再与 TA 载体连接或使用平末端克隆载体。

来源:重组大肠杆菌

规格:3U/μL

活性单位定义:1 单位活性定义为 74℃、30 分钟内,掺入 10nmoles 的 dNTPs 到酸性不溶物质所需的酶量。

酶存储缓冲液:50mM Tris-HCl(pH8.2),0.1mM EDTA,1mM DTT, 0.1%(v/v) Tween-20,0.1%(v/v) NP-40,50%(v/v) glycerol。

配套溶液:10X pfu Reaction Buffer, ON-068,200mM Tris-HCl (pH8.8, 25℃),100mM KCl,100mM (NH4)2SO4,20mM MgSO4,1% Triton X-100。

1. pfu  DNA polymerase 具有 3'→5' 的外切酶活性,因此延伸率(0.5-0.6kb/min) 低于 Taq DNA Polymerase(1kb/min),延伸时间取决于扩增产物的长度;同时, 由于 3'→ 5' 的外切酶活性,pfu DNA Polymerase 聚合酶可能会降解引物,因此配制反应体系时最后加入 pfu  DNA Polymerase。

2. 在用 pfu DNA Polymerase 扩增时, 需要更高的引物纯度。底物长度应大于 18bp,Tm 值在 55-80℃,引物浓度在 0.1-0.5μM 之间,略高于 Taq DNA Polymerase。

3. 对于高 GC 含量的模板,变性温度可提高到 98℃,对 DNA Polymerase 活性无影响。

储藏温度:-20℃

质控检测:无 DNase、Nickase、RNase 污染

纯度:SDS-PAGE 纯度:大于 95%

1. Kelly S. Lundberg, Dan D. Shoemaker, Michael W. W. Adams, et al. Gene 108, 1-6 (1991).